Tento článek analyzuje způsob kvantifikace toxického účinku.
Vyhodnocení toxicity xenobiotik lze stanovit řadou analýz akutní, subakutní, subchronické a chronické toxicity. Než se dostanete k toxikologickému testu, je velmi důležité identifikovat toxické z chemického hlediska. Provádějí se testy analytické chemie, poté je nutné určit, zda má molekula chirální centra a možné izomery.
Dále se stanoví čistota molekuly, rozpustnost, stabilita, tlak par, rozdělovací koeficient olej / voda, ionizační potenciál, chemická reaktivita a stabilita pH. Nakonec, pokud se podíváme na farmaceutické nebo kosmetické výrobky, analyzujeme také formulaci.
Na konci chemické identifikace je možné přistoupit k identifikaci produktu díky využití databází již známých produktů, zúžením vyhledávacího pole.
Pokud jde o obchod, přepravu, výrobu a vypouštění různých kategorií toxických produktů do ovzduší, existují velmi přísná legislativní ustanovení. Pokud toxické produkty nevyhovují těmto předpisům, nemohou být uvedeny na trh, a proto používány.
Posledním bodem toxikologických testů, než dojde k „analýze na člověka“, je analýza možných účinků na zvíře.
Volba, množství, aplikace toxikologických testů, používání a péče o laboratorní zvířata jsou upraveny zvláštními předpisy. Nejvíce používanými zvířaty pro toxikologické testy jsou krysy, myši, králíci, křečci, psi, kočky, prasata a primáti. Samozřejmě začínáme snadno ovladatelnými a malými zvířaty a poté pokračujeme - podle výsledků - k větším druhům podobným lidskému rodu.
Tato laboratorní zvířata musí růst za kontrolovaných podmínek, proto ve výbězích, kde probíhá normální cyklus světlo-tma, aby byl zachován cirkadiánní a hormonální rytmus, určitá úroveň vlhkosti a určitá teplota prostředí. Mohou být v novorozeneckém, adolescentním věku a dospělé státy.Tato zvířata musí být ZDRAVÁ a nesmí být nositeli infekcí, protože nakažené zvíře může kontaminovat zdravá zvířata, což kompromituje výzkumné analýzy.
Před provedením výzkumu na zvířeti je nutné nechat určitou dobu projít, aby se stabilizovaly všechny jeho fyziologické podmínky a zvyklo si na nové prostředí.Jakmile se zvíře adaptovalo, začínají toxikologické testy. Látky, které jsou testovány, musí být zvířeti podávány způsobem, který je nejpodobnější podávání člověku, tedy orálně, vdechnutím, subkutánním nebo intravenózním podáním zvířeti orálně spočívá v rozpuštění látky ve vodě nebo potravě. Tato metoda je velmi užitečné v případě chronické kontaminace, která je velmi blízká kontaminaci u lidí díky příjmu malých koncentrací toxických látek v potravinách. Tento způsob podávání má však malou nevýhodu, protože jen stěží dokážeme přesně vědět množství odebrané zvířetem během dne. K získání přesného výpočtu dávky, která má být podána zvířeti, musí být použity žaludeční sondy (podání sondou).
Dermální podání spočívá v rozetření látky na oholený zátylek zvířete.Proč zátylek? Toto místo aplikace slouží k tomu, aby se zvíře nelízlo nebo nepoškrábalo, čímž se eliminuje aplikovaná látka.
Inhalační cesta je velmi nákladný a obtížný způsob podávání. Existuje několik druhů „hyperbarických komor“, kde je zvíře nuceno dýchat plyn, který se do komory zavádí.
Co se po podání toxické látky u zvířete analyzuje?
- Analýza vlasů (alopecie nebo hirsutismus);
- Analýza charakteru;
- Analýza kůže;
- Analýza očí (zornice, slzení, rohovka, duhovka);
- Analýza chůze (analýza pohybu zvířete);
- Analýza motorické aktivity;
- Analýza opakovaných stereotypních pohybů (nepřetržité žvýkání, apatie, nepřetržité škrábání, dotýkání se uší, třes);
- Analýza senzorických funkcí (světelné záblesky, zvuky; dotek);
- Analýza autonomního nervového systému (teplota, sekrece, výkaly, moč, dýchání);
- Analýza CNS (chování zvířat);
- Analýza krevních složek (hematokrit, leukocyty, hemoglobin);
- Analýza vodní bilance (funkce ledvin, funkce jater, glykémie, moč);
- Pitevní vyšetření;
- Histologické vyšetření.
Všechny tyto testy na zvířatech prováděné v různých laboratořích - standardizované a mezinárodně uznávané - jsou zavedeny OECD (Organizace pro hospodářskou spolupráci a rozvoj). Zohledňují se různé body, jako je počet zvířat, počet dávek, které je třeba testováno, průběh vyhledávání, seskupení všech dat každého jednotlivého vyhledávání a nakonec interpretace dat (je důležité data reprodukovat).
Dosažení vynikajících výsledků výzkumu závisí na tom, kdo analýzy provádí, a také na použitém přístrojovém vybavení. Existuje katalog pravidel, známý jako pravidla správné laboratorní praxe nebo dokonce se zkratkou GLP, který je třeba respektovat, aby výsledky jsou spolehlivé a mezinárodně uznávané Pokud laboratoř nemá GLP, získané výsledky také nemusí být akceptovány, protože nerespektuje pravidla stanovená v manuálu.
Další články na téma "Experimentální hodnocení toxicity"
- Buněčná oprava
- Toxicita a toxikologie
- Identifikace toxikologického nebezpečí